黃曲霉素B1 ELISA試劑盒采用直接競爭ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉素偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉素B1(AFB1)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離黃曲霉素B1(AFB1)與微孔條上預(yù)包被的黃曲霉素B1偶聯(lián)抗原互相競爭抗黃曲霉素B1(AFB1)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中黃曲霉素B1(AFB1)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中黃曲霉素B1(AFB1)的含量.
樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
1.取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
2.強(qiáng)力振蕩3分鐘
3.用Whatman 濾紙過濾
4.取100ml處理后的樣品,加入400ml樣本稀釋液
5.取50μl稀釋液進(jìn)行分析(稀釋倍數(shù)10)
注意事項(xiàng)
1.使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。
2.不要使用過期試劑盒。
3 試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。
4.標(biāo)準(zhǔn)品中含有黃曲霉素B1(AFB1),使用時應(yīng)特別注意,操作時應(yīng)帶手套。
5.終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗(yàn)結(jié)果。
7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
8.稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
9.混合試劑時應(yīng)避免起泡。